선배, ligation이 안되는데요?
분자생물학 실험을 하다보면 vector를 제작하여 실험에 사용하게 되는 일이 생기기 마련이다. 요즘은 In fusion cloning이니, overlap cloner니, gibson assembly니 여러가지 vector를 조각내어 붙이는 기술들이 많이 있지만 (이것들도 시간이 나면 썰을 풀도록 하겠다), 그 이전까지만 해도 제한효소를 처리하여 잘라내는 것이 대부분 이었다. 그러면 다음과 같은 지루한 싸움이 시작된다. 1) Restriction enzyme을 고른다, - 이때, 내가 넣으려는 backbone vector에는 존재하지 않는, non-cutter들을 찾아 주고, 혹시나 두 enzyme이 compatible sticky end를 가지는지 확인을 꼭 해줘야 한다. 예를 들어, NheI 과, Xb..
2020. 11. 23.
